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對色譜柱柱效值進行跟蹤測算應注意的問題

點擊次數(shù):1463 發(fā)布時間:2020-05-26
   對色譜柱柱效值進行跟蹤測算應注意的問題
  我們也應記住柱效值并不足以預測在條件下的柱性能,對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有柱效并不能這種分離能力。
  不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著大的作用。
  幾種測量和計算柱效值的方法
  因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效(以理論塔板數(shù)n為單位)的公式習慣上定義為:
  式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰(從測峰寬的基線量起)有關(guān)的常數(shù),ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。
  假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì),由于柱內(nèi)的槽或空隙,也會出現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的處測量,計算的理論塔板數(shù)值就越大(性越低)。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個峰型(包括拖尾)的柱效值,同時為了定量的重復性,也需要色譜峰好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性***敏感的計算方法***適合。如果目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從******次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應選擇***簡便的方法。

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